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Transformar o potencial dos exossomas de tripanossomatideos em novas oportunidades (TEx)
- EXOTRYPANO Refª PTDC/CVT-CVT/28908/2017

RESUMO

Contextualização: Os exossomas são nanovesiculas libertadas para o meio extracelular por células e também por agentes patogénicos. Transportando macromoléculas activas para as células, os exossomas têm sido associados a processos de comunicação célula a célula. Estas vesículas parecem fundir-se com a membrana celular ou ser internalizadas pelas células, em ambos os casos libertando a carga no interior da célula. As moléculas transportadas podem interferir no reconhecimento celular e na sinalização das vias de activação, causando alterações ao estado da célula. Os tripanossomatídeos, agentes etiológicos de doenças parasitárias transmitidas por vectores, como as leishmanioses, a tripanossomíase africana e a tripanossomíase americana que afectam seres humanos, animais domésticos e selvagens, também libertam exossomas semelhantes às células eucarióticas superiores.
Objetivos: Tendo em conta as considerações anteriores, o EXOTRYPANO pretende investigar o potencial dos exossomas dos tripanossomatideos (TEx) na modelação da resposta imunitária do hospedeiro, ao reforçarem as hipóteses de sobrevivência dos parasitas que permanecem disponíveis para serem transmitidos naturalmente através dos seus vetores. Pretende-se, assim, determinar in vitro o efeito dos TEx na atividade funcional das células imunitárias do hospedeiro vertebrado.
Inovação: Com base em sistemas moleculares e celulares in vitro que envolvem células do sistema inato e adquirido, o EXOTRYPANO pretende avaliar o efeito de TEx na resposta imunitária desenvolvida pelo hospedeiro contra infeções parasitárias. Os resultados obtidos in vitro serão transpostos para modelos interativos que podem levar ao desenvolvimento de novas ferramentas imunoterapêuticas aplicadas à Leishmaniose, Doença do Sono, Nagana e Doença de Chagas e, eventualmente, a outras doenças não infeciosas como o cancro e doenças autoimunes.
Expectativas: Espera-se que o EXOTRYPNAO dê uma válida contribuição para o esclarecimento do papel dos TEx, nanovesiculas não infeciosas produzidas por Leishmania e Trypanosoma, no reconhecimento de células imunitárias e na indução das vias de activação, determinado o modo como e onde essas vesículas atuam e se podem ser aplicadas no redireccionamento do sistema imunitário, favorecendo o estabelecimento de uma resposta imunitária protetora, promovendo a redução da incidência de doenças parasitárias e assim contribuir para uma sociedade mais saudável. Espera-se também que o EXOTRYPANO participe na formação de estudantes e na comunicação da ciência e tecnologia, melhorando a consciência global da importância estratégica da ciência no dia-a- dia dos cidadãos.

PARCEIROS

Instituto de Higiene e Medicina Tropical (IHMT), Universidade Nova de Lisboa (UNL), Lisboa, Portugal

Faculdade de Medicina Veterinária (FMV), CIISA–Centro de Investigação Interdisciplinar em Sanidade Animal, Universidade de Lisboa (ULisboa), Lisbon, Portugal,

Health Sciences Centre/Federal University of Rio Grande do Norte (UFRN, Natal, Brasil)

Pretende chegar até nós? Contacte-nos:

Prof. Gabriela Santos-Gomes | santosgomes@ihmt.unl.pt
Global Health and Tropical Medicine, GHTM, Instituto de Higiene e Medicina Tropical, IHMT, Universidade Nova de Lisboa, UNL, Rua da Junqueira 100, 1349-008 Lisboa, Portugal

Prof. Isabel Pereira da Fonseca | ifonseca@fmv.ulisboa.pt
CIISA, Centre for Interdisciplinary Research in Animal Health. Faculty of Veterinary Medicine, University of Lisbon, Av. Universidade Técnica, 1300-477 Lisboa, Portugal

Prof. Marcelo Silva | mssilva.ufrn@gmail.com
UFRN, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Campus Universitário - Lagoa Nova, Natal - RN, 59078-970, Brasil

PUBLICAÇÕES

Rodrigues AV, Valério-Bolas A, Alexandre-Pires G, Aires Pereira M, Nunes T, Ligeiro D, Pereira da Fonseca I, Santos-Gomes G. 2022. Zoonotic Visceral Leishmaniasis: New Insights on Innate Immune Response by Blood Macrophages and Liver Kupffer Cells to Leishmania infantum Parasites. Biology. 11(1):100. https://doi.org/10.3390/biology11010100

Available at:
https://www.mdpi.com/2079-7737/11/1/100/htm

Dias-Guerreiro, Tatiana, Joana Palma-Marques, Patrícia Mourata-Gonçalves, Graça Alexandre-Pires, Ana Valério-Bolas, Áurea Gabriel, Telmo Nunes, Wilson Antunes, Isabel P.d. Fonseca, Marcelo Sousa-Silva, and Gabriela Santos-Gomes. 2021. "African Trypanosomiasis: Extracellular Vesicles Shed by Trypanosoma brucei brucei Manipulate Host Mononuclear Cells" Biomedicines 9, no. 8: 1056. https://doi.org/10.3390/biomedicines9081056

Available at:
https://www.mdpi.com/2227-9059/9/8/1056/htm

Alexandre-Pires G, Santos M, Rodrigues A, Pereira MA, Gomes J, Diaz SA, Gomes L, Basso A, Reisinho A, Gomes J, Leal R, Correia J, Bolas A, Meireles J, Santos-GomesI G, and Pereira-da-Fonseca I . 2020. Leishmaniosis: New Insights in a Changing World. In: Freitas Duarte A., Lopes da Costa L. (eds) Advances in Animal Health, Medicine and Production. Springer, Cham. https://doi.org/10.1007/978-3-030-61981-7_17

Available at: https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-3-030-61981-7_17

Santos MF, Alexandre-Pires G, Pereira MA, Gomes L, Rodrigues AV, Basso A, Reisinho A, Meireles J, Santos-Gomes GM and Pereira da Fonseca I. 2020. Immunophenotyping of Peripheral Blood, Lymph Node, and Bone Marrow T Lymphocytes During Canine Leishmaniosis and the Impact of Antileishmanial Chemotherapy. Front. Vet. Sci. 7:375. doi.org/10.3389/fvets.2020.00375

Available at: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fvets.2020.00375/full

Rodrigues AV, Alexandre-Pires G, Valério-Bolas A, Santos-Mateus D, Rafael-Fernandes M, Pereira MA, Ligeiro D, Nunes T, Alves-Azevedo R, Santos M, Pereira da Fonseca I, Santos-Gomes G. 2020. 3D-Hepatocyte Culture Applied to Parasitology: Immune Activation of Canine Hepatic Spheroids Exposed to Leishmania infantum. Biomedicines. 18;8(12):628. doi: 10.3390/biomedicines8120628.

Available at:
https://www.mdpi.com/2227-9059/8/12/628/htm

Pereira M, Valério-Bolas A, Saraiva-Marques C, Alexandre-Pires G, Pereira da Fonseca I, Santos-Gomes G. 2019. Development of Dog Immune System: From in Uterus to Elderly. Vet Sci. 2019;6(4):83. doi:10.3390/vetsci6040083

Available at:
https://www.mdpi.com/2306-7381/6/4/83/htm

Gabriel Á, Valério-Bolas A, Palma-Marques J, Mourata-Gonçalves P, Ruas P, Dias-Guerreiro T, Santos-Gomes G. 2019. Cutaneous Leishmaniasis: The Complexity of Host's Effective Immune Response against a Polymorphic Parasitic Disease. J Immunol Res. 2019;2019:2603730. doi: 10.1155/2019/2603730

Available at: https://www.hindawi.com/journals/jir/2019/2603730/

GRAUS ACADÉMICOS

- Maria Francisca Ferreira (2022) - Detection of Canine Vector-Borne Diseases agents in Greyhounds used as hunting dogs in Alentejo, Portugal. Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária. FMV/ULisboa. Orientação: Isabel Pereira da Fonseca. Em curso.

- Ofélia Cruz (2022) - “Exploring Extracellular Vesicles role in host-parasite communication”, Master Thesis, Instituto de Higiene e Medicina Tropical (IHMT/NOVA). Supervisor: Armanda Rodrigues and Co-supervisor - Gabriela Santos-Gomes.

- Marcos André Ferreira Santos (2020) - "Expressão génica de citocinas e resposta imune celular em cães com leishmaniose antes e sob os dois protocolos de tratamento de primeira linha: novas informações sobre a doença animal.” – Tese de Doutoramento. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade de Lisboa, 1 oct 2020, 205 pp. Orientação: Prof. Isabel Pereira da Fonseca (FMV) and Prof. Gabriela Santos Gomes (IHMT).

- Cláudia Jéssica Gonçalves Moreno (2020) - "Metaloproteinases de Tripanosomatídeos: Avalição de potenciais inibidores como ferramenta para o desenvolvimento de fármacos." PhD thesis, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica –UFRN (Natal, RGN, Brazil). Orientação: Doutor Marcelo de Sousa da Silva.

- Catarina Isabel Lopes Sequeira (2021) - "Infeção por Leishmania spp./Leishmaniose em gatos na Península de Setúbal." Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária. Faculdade de Medicinia Veterinaria, Universidade de Lisboa. 15 fev 2021. Orientação: Prof. Isabel Pereira da Fonseca.

- Joana Barbosa (2021) - “Deteção de anticorpos anti-Leishmania em soros de cães sujeitos a avaliação de eficácia da vacinação anti-rábica provenientes de Moçambique, Angola e Cabo Verde”. Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária. FMV/ULisboa. Orientação: Isabel Pereira da Fonseca. Em curso.

- Mafalda Pinto (2020) - “Indicadores ecológicos para detecção e caracterização de Leishmania infantum em mamíferos selvagens endógenos em Portugal: mangusto (Herpestes ichneumon) e raposa vermelha (Vulpes vulpes). Mestrado em Biologia Humana e Amabiente, FCUL. Coorientadora: Isabel Pereira da Fonseca. Em curso..

- Vera Laranjo (2021) - Vera Laranjo (2022) - “Deteção de anticorpos anti-Leishmania em roedores, lagomorfos e mustelídeos, tidos como animais de companhia, na Área Metropolitana de Lisboa”. Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária. FMV/ULisboa. 6 jun 2022. Orientação: Isabel Pereira da Fonseca.

- George Nakhratyan (2021) - “Desvendar o potencial imunomodulador de exossomas de Leishmania spp. utilizando um modelo celular de pele in vitro”, Dissertação de Mestrado, NOVA School of Science and Technology. Orientador: Armanda Rodrigues and Co-supervisor - Gabriela Santos-Gomes.

- Juliana Weber (2021) - “Efeito da vesiculas extracelulares de espécies cutâneas de Leishmania em macrófagos de murganho”, Master Thesis, Instituto de Higiene e Medicina Tropical (IHMT/NOVA). Supervisor: Gabriela Santos-Gomes and Co-supervisor: Armanda Rodrigues.

- Flávia Martins (2022) - “Efeito de vesículas extracelulares de Leishmania spp. na actividade funcional de leucócitos caninos” . Master Thesis, Instituto de Higiene e Medicina Tropical (IHMT/NOVA). Supervisor: Armanda Rodrigues and Co-supervisor - Gabriela Santos-Gomes.

- Bruna Freitas (2021) - “Vesículas extracelulares de Leishmania amazonensis: activação de macrófagos murinos e antigenicidade” Master Thesis, Instituto de Higiene e Medicina Tropical (IHMT/NOVA). Supervisor: Gabriela Santos-Gomes.

ESTÁGIOS

Mafalda Meunier
Juliana Weber
George Nakhratyan
Flávia Martins
Bruna Freitas
Sofia Gabriel

NOTÍCIAS

A equipa do projecto EXOTRYPANO participou ainda no CIISA Congress 2022, FMV, Lisboa 11-12 Novembro 2022, apresentando o poster Canine Leishmaniosis: exploring the activity of dendritic cells from dogs under different antileishmanial prophylaxis strategies. Marta Monteiro, Ana Valério-Bolas, Mafalda Meunier, Armanda Rodrigues, Graça Alexandre-Pires, Rodolfo Leal, Gabriela Santos-Gomes, Isabel Pereira da Fonseca. Poster 131.

Mais informação disponível em:
https: congressociisa.fmv.ulisboa.pt

Julina Weber recebeu o prémio the Professor Doutor João Fraga de Azevedo para a área da parasitologia médica pela sua tese de mestrado intutulada “Efeito da vesiculas extracelulares de espécies cutâneas de Leishmania em macrófagos de murganho”. A cerimónia realizou-se no dia 4 de Novembro de 2022 no Instituto de Higiene e Medicina Tropical (IHMT).

Mais informação disponível em:
https://www.ihmt.unl.pt/abertura-solene-do-ano-letivo-2022-23-directo-no-youtube

A equipa do projecto EXOTRYPANO participou no encontro científico internacional ICOPA, que decorreu em Copenhaga nos dias 21-26 de Agosto de 2022, onde apresentou o trabalho “Cutaneous leishmaniasis: exploring Leishmania sp. Extracellular vesicles as immunomodulators of host skin immune system”. Este trabalho foi apresentado por Armanda Rodrigues, em colaboração com George Nakhratyan, Juliana Weber, Graça Alexandra-Pires, Ana Valério-Bolas, Telmo Nunes, Isabel Pereira da Fonseca e Gabriela Santos-Gomes.

Mais informação disponível em:
https://icopa2022.org

A equipa do projecto EXOTRYPANO participou no 3rd International Caparica Conference on Leishmaniasis 2022, que decorreu na Costa de Caparica nos dias 24-26 de Outubro de 2022, com a apresentação oral intitulada “Liver involvement in canine visceral leishmaniasis: an immunological perspective”. Este trabalho foi apresentado por Armanda Rodrigues, em colaboração com Graça Alexandr-Pires, Ana Valério-Bolas, Maria Aires-Pereira, Telmo Nunes, Isabel Pereira da Fonseca e Gabriela Santos-Gomes.

Mais informação disponível em:
https://www.leishmaniasis2022.com

Os membros da equida do EXOTRYPANO Gabriela Santos-Gomes e Armanda Rodrigues do IHMT e Isabel Pereira da Fonseca, Graça Alexandre Pires e Marta Monteiro da FMV, marcaram presença no congresso internacional WORLDLEISH 7 que decorreu em Cartagena, Colômbia de 1 a 6 de Agosto de 2022.

A Lista de resumos encontra-se disponível em:
https://www.worldleish7.org/scientificprogram

WORLDLEISH 7 é um Congresso internacional dedicado ao parasita Leishmania e à doença Leishmaniose, onde investigadores de todo o mundo se juntam para apresentar e discutir os últimos avanços no combate a esta doença tropical negligenciada.

Mais informação disponível em:
http://worldleish.org/wp

Lista de trabalhos apresentados pela equipa:

LEISHMANIA INFANTUM AND CANINE MACROPHAGES: NEW INSIGHTS ON HOST-PARASITE IMMUNE CO-EVOLUTION. Armanda Rodrigues, Ana Valério-Bolas, Graça Alexandre-Pires, Maria A. Pereira, Telmo Nunes, Dário Ligeiro, Isabel Pereira da Fonseca, Gabriela Santos-Gomes. Oral presentation. ID: 100253

CYTOKINE GENE EXPRESSION AND LYMPHOCYTE IMMUNOPHENOTYPING IN DOGS WITH LEISHMANIOSIS. Marcos Santos, Marta Monteiro, Ana Valério-Bolas, Graça Alexandre-Pires, Maria A. Pereira, Armanda V. Rodrigues, Gabriela Santos-Gomes, Isabel Pereira da Fonseca. Oral presentation. ID: C025-05. Pg. 357.

EFFECT OF EXTRACELLULAR VESICLES SHEED BY LEISHMANIA SHAWI ON IMMUNOMODULATION OF MURINE MACROPHAGES. Juliana Inês Weber; Maria Armanda Rodrigues; Ana Valério-Bolas; Manuela Colla Carvalheiro; Graça Alexandre-Pires, Wilson Talhão Antunes, Isabel Pereira da Fonseca; Gabriela Santos-Gomes. Oral presentation. ID: 100257

EXTRACELLULAR VESICLES OF LEISHMANIA AMAZONENSIS: ACTIVATION OF MURINE MACROPHAGES AND ANTIGENICITY. Bruna Eugênia de Freitas, Armanda Viana Rodrigues, Joana Palma-Marques, Ana Valério-Bolas, Rodrigo Pedro Soares, Graça Alexandre-Pires, Isabel Pereira da Fonseca, Hélida Monteiro de Andrade, Gabriela Santos-Gomes. Poster presentation. ID: 100317

ANALYSIS OF LEISHMANICIDAL AND IMMUNOMODULATORY ACTIVITY OF NATURAL AND SYNTHETIC PRODUCTS. Raíssa Couto Santana, Maria Armanda Viana Rodrigues, Afonso Santine Magalhães Mesquita Velez, Marco Edilson Freire de Lima, Debora Decoté-Ricardo, Celio Geraldo Freire-de-Lima, Lucia Helena Pinto da Silva, Gabriela Santos-Gomes. Poster presentation. ID: 100703

CONNECTING THE DOTS: A CARTOON NETWORK THAT PEEKS INTO LEISHMANIA SPP. INFECTION AND EVASION. Beatriz Pratas Martins, Maria Pereira, Telmo Nunes, Armanda Rodrigues, Wilson Talhão Antunes, Ana Valério-Bolas, Juliana Weber, Bruna Freitas, Isabel Pereira da Fonseca, Gabriela Santos-Gomes, Graça Alexandre-Pires. Poster presentation. ID: 100312

LEISHMANIA INFANTUM INFECTION IN EXOTIC PETS LIVING IN METROPOLITAN AREA OF LISBON, PORTUGAL: WHAT DO WE KNOW? Vera Laranjo, Sara Zúquete, Mariana Bernardino, Susana Azinheira, Gabriela Santos-Gomes, Isabel Pereira da Fonseca. Poster presentation. ID: P4-079. Pg. 1445.

MOLECULAR AND SEROLOGICAL SURVEY OF LEISHMANIA INFANTUM IN WILD LEPORIDAE FROM MAINLAND PORTUGAL. Marta Alves, Jacinto Gomes, Fábio Abade dos Santos, Carina Carvalho, Margarida Duarte, Isabel Pereira da Fonseca. Poster presentation. ID: P4-080. Pg. 1447.

A equipa do projecto EXOTRYPANO participou no XLVII Encontro annual da Sociedade Portuguesa de Imunologia (SPI) que teve lugar em Lisboa nos dias 20-22 de Abril de 2022 com o trabalho "Extracellular vesicles: evolving the therapeutics of tomorrow for Leishmaniasis" apresentado como Poster. Este trabalho foi apresentado por Armanda Rodrigues, em colaboração com Juliana Weber, Graça Alexandra-Pires, Ana Valério-Bolas, Wilson Talhão Antunes, Telmo Nunes, Isabel Pereira da Fonseca e Gabriela Santos-Gomes.

Mais informação disponível em https://www.spimunologia.org/news/spi-2022

1º seminário sobre “Novas abordagens para combater a tripanossomíase” a ser realizado pelo IHMT, como Centro Colaborativo (CCol) da Organização Mundial da Saúde (OMS), previsto para 2022. Mais informações em breve.

A equipa EXOTRYPANO tem novas publicações, disponíveis com livre acesso:

Disponível em: https://www.mdpi.com/2079-7737/11/1/100/htm

Disponível em: https://www.mdpi.com/2227-9059/9/8/1056/htm

Na edição do CAPES 2021, foi atribuída uma menção honrosa à investigadora pos-doc Claudia Jassica Gonçalves Moreno, membro da equipa (UFRN) do projeto Exotrypano. “Prémio de Teses da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (Capes) da edição 2021”. A investigadora teve orientação do professor Marcelo de Sousa da Silva.
Mais informações: https://ufrn.br/imprensa/noticias/50772/cinco-teses-da-ufrn-sao-premiados-pela-capes

O Congresso Worldleish 7, ocorrerá em Cartagena, COLOMBIA

www.worldleish7.org

A vida sob o Microscópio

Legenda 1:

Promastigotas de Leishmania shawi. O parasita possui um corpo alongado e um flagelo visível.
Imagem obtida por microscopia electrónica de varrimento (Alexandre-Pires, G.)

Legenda 2:

Macrófagos do sangue de cão. (ampliação x 400). Microscopia ótica sem coloração (Rodrigues, MA).

O EXOTRYPANO é uma projeto de investigação Portugal-Brasil que nos próximos três anos pretende analisar o processo de comunicação entre nano vesículas extracelulares libertadas por tripanossomatídeos e as células do sistema imunitário do hospedeiro.

O EXOTRYPANO reúne investigadores de três instituições académicas de Portugal, IHMT-NOVA e FMV-ULisboa (Lisboa), e do Brasil, UFRN (Natal, RGN) para investigar os mecanismos utilizados pelas nanovesículas extracelulares emitidas por Leishmania, Trypanosoma cruzi e Trypanosoma brucei para influenciar a resposta imunitária do hospedeiro. Este projeto visa contribuir para melhorar o tratamento e controlo da leishmaniose, doença de Chagas e tripanossomose africana, que são doenças parasitárias que afetam as populações humanas e animais em todo o mundo, especialmente em África e na América do Sul. As atividades desta iniciativa de investigação académica contam com o apoio da Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT, Ministério da Ciência, Tecnologia e Ensino Superior).

As doenças parasitárias transmitidas por vetores afetam significativamente o bem-estar de milhões de pessoas em todo o mundo, especialmente em países de baixa renda, constituindo um fardo substancial para os sistemas de saúde e, também causam

doenças em animais domésticos e selvagens. A tripanossomose humana africana ou a doença do sono e a tripanossomose animal africana ou nagana causadas por T. brucei ocorrem na região subsaariana. Esta doença parasitária que afeta o gado, é reconhecida como sendo um significativo obstáculo ao desenvolvimento socioeconómico das populações. Na América Central e do Sul, T. cruzi causa tripanossomíase americana ou doença de Chagas em humanos, animais selvagens e domésticos, incluindo cães e gatos. A doença de Chagas constitui um grande problema de saúde pública e é considerada uma doença tropical negligenciada. Esta parasitose está a espalhar-se para outras áreas geográficas, constituindo uma doença emergente de preocupação global. Apresentando uma dispersão mundial, com exceção da Austrália, Ilhas do Pacífico e Antártica, a Leishmaniose é causada por Leishmania, também transmitida por artrópodes, e afeta humanos e canídeos, principalmente cães. O tratamento destas doenças parasitárias negligenciadas, maioritariamente associadas à pobreza, não tem sido um processo fácil e só existem vacinas profiláticas disponíveis para a leishmaniose canina.

O EXOTRYPANO faz uso das metodologias celulares e imunológicas, da transcritómica e de tecnologias de imagem de alta definição para investigar a relação que se estabelece entre vesículas extracelulares de tripanossomatídeos e as células imunitárias do hospedeiro. Todos os dados gerados no projeto serão centralizados, permitindo análises bioinformáticas e bioestatísticas detalhadas e abrangentes.

O EXOTRYPANO tem como objetivo principal incrementar o conhecimento das vias moleculares utilizadas pelas vesículas extracelulares de tripanossomatídeos para influenciar a resposta imunitária do hospedeiro em paralelo, em três doenças parasitárias: Leishmaniose, Tripanossomose Americana e Tripanossomose Africana (Doença do Sono e Nagana). Espera-se encontrar padrões que apontem para a ativação de vias imunopatogénicas comuns pelas vesículas extracelulares parasitárias, identificando biomarcadores que possam ajudar a melhorar a eficiência do tratamento e a prevenção destas doenças parasitárias.

As atividades do EXOTRYPANO tiveram início formal com a primeira reunião que ocorreu no IHMT-NOVA (Lisboa, Portugal) em 29 de janeiro de 2020.

Financial Support

FCT – Project EXOTRYPANO - Transformar o potencial dos exossomas de tripanossomatideos em novas oportunidades (TEx), Ref. PTDC/CVT-CVT/28908/2017

Contacts

IR
Prof. Gabriela Santos-Gomes
SantosGomes@ihmt.unl.pt

co-IR
Prof. Isabel Pereira da Fonseca
ifonseca@fmv.ulisboa.pt

Links

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UFRN